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XII
Congreso de la Sociedad Española de Fitopatología (SEF),
2004
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3962 |
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Aplicación de un método de extracción de ADN
para la identificación de nematodos fitopatógenos por
técnicas moleculares
Abelleira, A.; Aguín,
O.; Balado, M.; Mansilla, J.P.
Estación Fitopatolóxica do
Areeiro, Excma. Diputación Provincial de Pontevedra, Subida a la Robleda
s/n, 36153 Pontevedra, España.
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RESUMEN: La
determinación morfológica y morfométrica de nematodos
fitopatógenos en los laboratorios de diagnóstico, dado el amplio
rango de especies existentes, resulta complicada. En los últimos
años, se han desarrollado técnicas moleculares, sobre todo para
la identificación de las especies más importantes, que facilitan
enormemente el diagnóstico, por lo que se están implantando para
su uso rutinario. Antes de caracterizar un determinado nematodo mediante un
marcador molecular apropiado, es necesario extraer su ADN, por eso se considera
este paso como el más crítico a la hora de aplicar
técnicas moleculares. Se han descrito distintos métodos de
extracción para distintos géneros. Dada la complejidad que
supone, para un laboratorio de diagnóstico, utilizar protocolos
específicos de extracción para cada nematodo el objetivo de este
trabajo fue evaluar la eficacia de un único método de
extracción de ADN para todos los principales géneros de nematodos
fitopatógenos. El protocolo estudiado fue el propuesto por Bulman y
Marshall (1997) para la extracción de ADN de Globodera. El método
se aplicó a nematodos de los géneros Globodera,
Heterodera y Meloidogyne, probando cuatro tipos de material de
partida: quistes, adultos, juveniles y huevos. Los resultados demostraron que
este método de extracción permite obtener, de forma
rápida, repetitiva y fiable, el suficiente material genético de
nematodos de estos géneros y a partir de todos los materiales de
extracción, para su utilización posterior en técnicas
moleculares de identificación.
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